一、 不用選版本、不用加步驟-珀羅汀無細胞試劑盒,默認支持二硫鍵合成
在蛋白表達這件事上,你有沒有遇到過這樣的情況?
條帶有了,但蛋白沒活性
SPR / BLI 信號異常,重復性差
排查到最后,問題往往指向同一個原因——二硫鍵沒有正確形成。

二、二硫鍵形成,真的是無細胞蛋白表達的進階需求嗎?
對于一些老牌的無細胞蛋白表達體系:
普通蛋白→普通表達體系
含二硫鍵蛋白→換體系、加試劑、多一步優化、多一筆費用
于是,二硫鍵形成被默認為一種“需要額外付出"的高級選項。
然而,大量功能蛋白、相互作用蛋白、分泌蛋白,本來就依賴二硫鍵。它并不“高級", 而是許多功能蛋白與分泌蛋白賴以成立的基礎結構。珀羅汀無細胞蛋白表達體系在設計之初,便將二硫鍵形成作為默認條件之一,使蛋白在體外也能更接近其天然構象。
三、為什么二硫鍵在一些傳統無細胞蛋白表達體系里面這么麻煩?
以一些傳統的大腸桿菌無細胞蛋白表達體系為例,因為體系環境偏還原性,因此二硫鍵難以穩定形成
因此,這些老牌的無細胞蛋白表達試劑盒,想要二硫鍵,往往意味著:
額外添加折疊因子
調整氧化還原條件
或者直接更換一整套體系
復雜、昂貴,而且不確定。
四、 珀羅汀無細胞蛋白表達體系:把“二硫鍵"從增配選項,變成“默認設置“
在珀羅汀看來,一個更合理的問題不是:這個蛋白要不要做二硫鍵?
而是:為什么表達體系不能一開始就為二硫鍵做好準備?
因此,珀羅汀的無細胞蛋白表達試劑盒,從設計之初就遵循一個原則:默認支持二硫鍵的形成
? 無需區分“普通型 / 二硫鍵增強型"
? 無需額外添加輔助因子
? 無需額外實驗步驟
? 無需額外費用
開箱即用,二硫鍵已就位。
珀羅汀無細胞蛋白表達試劑盒性能展示

五、對科研人員來說,這意味著什么?
少一次賭體系的決策:
你不需要在實驗一開始就判斷:“這個蛋白是不是一定需要二硫鍵?"體系已經替你準備好答案。
少一次表達成功但功能失敗的返工:
不再停留在:SDS-PAGE 看著沒問題,但是功能實驗卻反復失敗。
把精力用在真正重要的問題上:
比如親和力、活性、構象以及生物學意義。
“二硫鍵形成不應該是:
一個需要額外付費的功能
一個只有“特殊蛋白"才能擁有的選項
它應該是——一個合格無細胞蛋白表達體系的基本能力。

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